Streptococcus mutans detection in saliva and colostrum samples / Detecção de Streptococcus mutans em amostras de saliva e colostro

ABSTRACT Objective To detect Streptococcus mutans in colostrum and saliva of neonates and compare with its detection in saliva of mothers. Methods Forty-three healthy women, full-term gestations with no complications, submitted to elective Cesarean section, and their newborns were included in the study. Samples were investigated by polymerase chain reaction to detect S. mutans in genetic material from the samples. Results Approximately 16% of colostrum samples showed S. mutans , but not correlated with the presence of the bacteria in both samples of saliva. S. mutans was detected in 49 and 30% of saliva samples of mothers and neonates, respectively. There was a positive correlation in S. mutans detection between types of saliva. The number of maternal samples of saliva with detectable S. mutans was smaller in women receiving dental treatment during pregnancy. Tooth brushing, three times a day, influenced the detection of S. mutans in both the saliva and the colostrum. Conclusion Although maternal saliva may present S. mutans , few samples of colostrum present the bacteria. The presence of bacteria in neonate saliva may be related to contact before birth. Dental treatment and hygiene habits seem to influence the detection of S. mutans in samples of maternal saliva and colostrum.

RESUMO Objetivo Detectar Streptococcus mutans no colostro e na saliva de recém-nascido, e comparar com a detecção na saliva da mãe. Métodos Foram incluídos no estudo 43 mulheres saudáveis, com gestações a termo e sem complicações, que tiveram cesariana eletiva, e seus recém-nascidos. As amostras foram investigadas por reação de polimerase em cadeia para a detecção de S. mutans em material genético extraído das amostras. Resultados Cerca de 16% das amostras de colostro apresentaram S. mutans , não sem correlação com a presença das bactérias em ambas amostras de saliva. S. mutans foi detectado em 49 e 30% das amostras de saliva das mães e recém-nascidos, respectivamente. Houve correlação positiva na detecção de S. mutans entre os tipos de saliva. O número de amostras de saliva materna com S. mutans detectável foi menor nas mulheres que receberam tratamento odontológico durante a gravidez. A escovação três vezes ao dia influenciou na detecção do S. mutans tanto no saliva quanto no colostro. Conclusão Embora a saliva materna possa apresentar S. mutans , poucas amostras de colostro apresentam a bactéria. A presença de bactéria na saliva de neonatos pode estar relacionada ao contato antes do nascimento. O tratamento odontológico e os hábitos de higiene parecem influenciar na detecção de S. mutans em amostras de saliva e colostro maternos.

Comparisons of IgA response in saliva and colostrum against oral streptococci species

Abstract The present study compared IgA specificity against oral streptococci in colostrum and saliva samples. Sixty-two mother-and-child pairs were included; samples of colostrum (C) and saliva (MS) were collected from the mothers and saliva samples were collected from babies (BS). The specificity of IgA against Streptococcus mutans and S. mitis were analyzed by western blot. Only 30% of babies’ samples presented IgA reactivity to S. mutans, while 74 and 80% of MS and C, respectively, presented this response. IgA reactivity to S. mutans virulence antigens (Ag I/II, Gtf and GbpB) in positive samples showed differences between samples for Gtf and especially for GbpB (p < 0.05), but responses to Ag I/II were similar (p > 0.05). The positive response of Gtf-reactive IgA was different between C (90%) and MS (58%) samples (p < 0.05), but did not differ from BS (p > 0.05). GbpB was the least detected, with 48 and 26% of C and MS, and only 5% of BS samples presenting reactivity (p > 0.05). Eight percent of MS and C samples presented identical bands to SM in the same time-point. In conclusion, the differences of IgA response found between C and MS can be due to the different ways of stimulation, proliferation and transportation of IgA in those secretions. The colostrum has high levels of IgA against S. mutans virulence antigens, which could affect the installation and accumulation process of S. mutans, mainly by supplying anti-GbpB IgA to the neonate.

Somatic cell counts as an indicator of mammary infection in periparturient cows / Contagem de células somáticas como indicador de infecção mamária em vacas periparturientes

The somatic cell count (SCC) is a screening test for the evaluation of intramammary infection; however, changes in mammary secretion during colostrogenesis can promote a physiological increase in the SCC, potentially reducing its reliability in the diagnosis of mastitis. Therefore, the aim of this study was to evaluate bovine colostrum SCC as an indicative parameter of breast infection in Holstein periparturient cows. A total of 80 samples were harvested from the first milking colostrum of 20 cows and were subjected to manual SCC and bacteriological examination. Bacterial growth was present in 36.62% of the crops; coagulase-negative Staphylococcus (CNS) was the predominant microorganism (76.92%). The median SCC in infected cows (1.8 × 106 cells/mL) was significantly higher than in uninfected cows (0.9 × 106 cells/mL) (p = 0.0451). The sensitivity (10015%), specificity (1002.2%), and false positive (1002.2%) of the SCC decreased gradually when thresholds of 0.210.0 × 106 cells/mL were adopted. In contrast, the proportion of false negatives (084.6%) revealed an opposite trend. The threshold of greatest concordance between SCC and bacteriological examination was 10.0 × 106 cells/mL; however, the sensitivity rates (15.4%), specificity (2.2%), and false positive (2.2%) were very low. Based on these results, we conclude that SCCs increased prior to the infectious processes of the mammary gland, particularly in the CNS group. However, physiological changes caused by colostrogenesis resulted in poor concordance between the SCC and bacteriological examination of the colostrum...

A contagem de células somáticas (CCS) é um teste de triagem para avaliação de infecção intramamária, porém, as alterações na composição do colostro observadas durante a colostrogênese podem promover o aumento fisiológico da CCS e inviabilizar o uso desta prova para diagnóstico da mastite. Assim, o objetivo desta pesquisa foi avaliar a CCS do colostro como parâmetro indicativo de infecção mamária em vacas Holandesas periparturientes. Para tanto, foram colhidas 80 amostras de colostro de primeira ordenha, provenientes de 20 vacas, para a CCS manual e exame bacteriológico (EB). Observou-se crescimento bacteriano em 36,62% dos cultivos, com predomínio de Staphylococcus coagulase-negativa (SCN) (76,92%). O valor mediano da CCS de vacas infectadas (1,8 x106 células/mL) foi maior do que o obtido para as vacas sadias (0,9 x106 células/mL) (P=0,0451). A sensibilidade (100 a 15%), especificidade (100 a 2,2%) e falso-positivo (100 a 2,2%) diminuíram gradativamente quando os limiares de 0,2 a 10,0 x106 células/mL foram adotados. Em contrapartida, a proporção de falso-negativo (0 a 84,6%) apresentou perfil inverso. O limiar de maior concordância entre a CCS e EB foi de 10,0 x106 células/mL, porém os índices de sensibilidade (15,4%), especificidade (2,2%) e falso-positivo (2,2%) foram muito baixos. Com base nos resultados encontrados, conclui-se que a CCS apresentou elevação diante dos processos infecciosos da glândula mamária (GM), causados especialmente por bactérias do grupo SCN. No entanto, as alterações fisiológicas decorrentes da colostrogênese resultaram em baixa concordância entre a CCS e o exame bacteriológico do colostro...

Efeitos do aditivo do leite materno com ferro sobre as propriedades bacteriostáticas do leite materno / Effects of human milk fortifier with iron on the bacteriostatic properties of breast milk

OBJETIVO: Comparar o crescimento bacteriano em colostro puro e colostro com aditivo do leite materno contendo ferro. MÉTODOS: Foram comparadas 78 amostras de colostro puro ou colostro com adição de aditivo do leite materno contendo ferro para avaliar o crescimento de Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. Para a análise qualitativa, discos de papel-filtro foram imersos em amostras de cada grupo e incubados por 48 horas com 10¹ Unidades Formadoras de Colônias/mL de cada cepa. Para a avaliação quantitativa, 1 mL de cada cepa contendo 10(7) Unidades Formadoras de Colônias/mL foi homogeneizado com 1 mL, tanto de colostro puro quanto de colostro com aditivo do leite materno, espalhado em placa de Petri e incubado a 37ºC. O número de Unidades Formadoras de Colônias foi contado 24 horas depois. RESULTADOS: A análise qualitativa não mostrou nenhuma diferença no crescimento bacteriano. Na avaliação quantitativa, o crescimento de Escherichia coli (EC) no grupo C foi de 29,4±9,7 x 10(6) CFU/mL, enquanto no grupo FM85 foi de 31,2±10,8 x 10(6) CFU/mL. A diferença entre o crescimento médio foi de 1,9±4,9 x 10(6) CFU/mL (p = 0,001). Não houve diferenças no crescimento de Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. CONCLUSÃO: A adição de ferro a essa concentração reduz a ação bacteriostática do leite materno contra Escherichia coli.

OBJECTIVE: To compare bacterial growth in pure colostrum versus colostrum with human milk fortifier (HMF) containing iron. METHODS: The growth of Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Pseudomonas aeruginosa in 78 samples of pure colostrum or colostrum with added iron-containing HMF was compared. For qualitative analysis, filter paper discs were immersed in samples from each group and incubated for 48 hours with 10¹ colony forming units (CFUs)/mL of each strain. For quantitative assessment, 1 mL of each strain containing 10(7) CFUs/mL was homogenized with 1 mL of either colostrum or colostrum with human milk fortifier, seeded into a Petri dish, and incubated at 37ºC. Twenty-four hours later, the number of CFUs was counted. RESULTS: The qualitative analysis showed no difference in bacterial growth. In the quantitative evaluation, E. coli growth in the control group was 29.4±9.7 x 10(6) CFU/ mL, while in the HMF group it was 31.2±10.8 x 10(6) CFU/mL. The difference between the average growth was 1.9±4.9 x 10(6) CFU/mL (p = 0.001). There were no differences in S. aureus and P. aeruginosa growth. CONCLUSION: Addition of iron at this concentration reduces breast milk bacteriostatic action against E. coli.

Identification of Lactobacillus spp. in colostrum from Chilean mothers

The biodiversity of Lactobacillus spp. in colostrum samples from 116 Chilean mothers was analyzed by PCR and 16S rDNA sequencing. Lactobacilli were isolated in 55.3% of the samples, with concentrations of 3.33 ± 0.55 (log CFU/ml). The predominant species were L. plantarum (64%), L. fermentum (16%) and L. pentosus (9%). 28% of the isolated strains were resistant to gastric pH and bile salts, suggesting that they could be used as probiotics.

Se analizó la biodiversidad de especies de Lactobacillus en muestras de calostro de 116 madres chilenas mediante PCR y secuenciación del rDNA 16S. Se aislaron lactobacilos en 55,3% de las muestras, con concentraciones de 3,33 ± 0,55 (log UFC / ml). Las especies predominantes fueron L. plantarum (64%), L. fermentum (16%) y L. pentosus (9%). 28% de las cepas aisladas fueron resistentes a pH gástrico y a las sales biliares, lo que sugiere que podrían ser utilizados como probióticos.

Intramammary infections during the periparturient period in Argentine dairy heifers / Infecciones intramamarias durante el periparto en vaquillonas en Argentina

Prevalence of intramammary infections at prepartum and postpartum in primigravid heifers from five dairy herds located in the central dairy area of Argentina was determined. Mammary secretion samples from 140 heifers (560 mammary quarters) were obtained 14 days prior to the expected calving day and within 7 days after parturition and subjected to bacteriological analysis. No clinical mastitis cases were detected during the study. The number of infected heifers in at least one mammary quarter at pre and postpartum was 87 (62.2%) and 53 (37.8%), respectively. The most prevalent mastitis pathogens at prepartum among samples yielding a positive bacteriological culture were coagulasenegative staphylococci (69.07%), Staphylococcus aureus (12.71%) and Streptococcus uberis (4.42%). A decrease on isolation frequency of coagulase-negative staphylococci (53.41%) and S. uberis (2.27%) was observed at postpartum, while that of S. aureus showed an increase (21.59%). Presence of intramammary infections appeared to be associated with some management conditions. These results highlighted the need to improve diagnosis and control measures in replacement heifers.

Se determinó la prevalencia al preparto y posparto de infecciones intramamarias causadas por organismos patógenos de mastitis en vaquillonas primíparas de cinco establecimientos lecheros ubicados en la cuenca central santafesina. Se tomaron muestras de secreción mamaria de 140 vaquillonas (560 cuartos mamarios) aproximadamente 14 días antes de la fecha probable de parto y dentro de los 7 días posparto, y se procesaron bacteriológicamente. No se detectaron casos de mastitis clínicas durante el estudio. El número de vaquillonas infectadas en al menos un cuarto mamario al preparto y posparto fue de 87 (62,2%) y 53 (37,8%), respectivamente. Los organismos patógenos más prevalentes al preparto entre las muestras con cultivo bacteriológico positivo fueron estafilococos coagulasa negativos (69,07%), Staphylococcus aureus (12,7%) y Streptococcus uberis (4,42%). Al posparto se observó un descenso en la frecuencia de aislamiento de estafilococos coagulasa negativos (53,41%) y S. uberis (2,27%), mientras que la de S. aureus mostró un aumento (21,59%). La presencia de infecciones intramamarias pareció estar asociada con algunas prácticas de manejo. Estos resultados ponen de manifiesto la importancia de hacer extensivo el diagnóstico y control de la enfermedad a las vaquillonas de reemplazo antes de su ingreso al rodeo en ordeño.

Avaliação da eficácia do colostro bovino hiperimune na infecção experimental de roedores com Cryptosporidium parvum

O Cryptosporidium parvum é um protozoário que inicialmente estava associado à AIDS. Posteriormente, diversos surtos de criptosporidiose de veiculação hídrica passaram a ser descritos. Nenhuma droga foi eficaz no controle dessa infecção. Alguns estudos mostraram eficácia do colostro de vacas hiperimunizadas com C. parvum. Vários camundongos e ratos foram inoculados com 2x10 oocistos de C.parvum. O colostro bovino hiperimune empregado no experimento foi positivo até a diluição de 1:55.000. Dois modelos murinos com imunossupressão - C57BL/6 knock out de CD4 e BALB/c nude não desenvolveram infecção até o 18º dia pós-inoculação. Os resultados mostraram que os camundongos C57BL/6 e os ratos Fischer 344 (F344) recém-nascidos são susceptíveis à infecção com esse parasita. O colostro hiperimune reduziu o número de ooscitos de C. parvum em ambas as linhagens. Entretanto, apenas os ratos F344 evidenciaram maior preservação da arquitetura da mucosa intestinal quando foram tratados com esse produto. A linhagem de ratos F344 demonstrou ser um modelo experimental adequado e promissor para o estudo da infecção com C. parvum.

Prevalência de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA) produtores de leite humano ordenhado e seu crescimento em colostro humano / Prevalence of enterotoxigenic Staphylococcus aureus resistant to meticilin (MRSA) in milked samples of human milk and their growth in human colostrum

Foram coletados e analisadas 500 amostras de leite humano ordenhado, oriundas de cinco cidades brasileiras (100 de cada), visando detectar cepas de staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA) produtoras de enterotoxinas. Nestas amostras foram encontradas 57 cepas de mMRSA, sendo confirmada a presença do gene mecA, responsável pela resitência, por meio de sonda molecular específica. Posteriormente, 40 das 57 cepas isoladas, foram selecionadas de modo a conter todas as cepas representantes de cada regiäo, com exceçäo da que apresentava a maioria, da qual foram selecionadas aleatoriamente 10 cepas para completar as 40 a serem analisadas. As cepas foram submetidas a pesquisa de quatro enterotoxinas por meio do Kit SET-RPLA (oxoid). Dentre estas, foram encontradas duas produtoras de enteroxina B, com as quais foram feitas curvas de crescimento em colostro humano e em " Trypticase Soy Broth", Tendo por fim avaliar o impacto dos fatores de defesa do colostro sobre o desenvolvimento e produçäo de toxinas pelos microorganismos em questäo. Para tal, foram inoculadas 5,0 x 10 elevado ao quadrado UFC/ml, que representava aproximadamente a média das contagens das cepas S. aureus nas amostras que continham as cepas resitentes à meticilina. Após cinco horas de incubaçäo a 37 graus celcius as populaçöes eram superiores a 4,9 x 10 elevado a quatro UFC/ml e apresentavam liberaçäo de enterotoxinas no meio de cultura e no colostro. Nossos resultados ressaltam a importância dos cuidados higiênicos-sanitários e das técnicas apropriadas de preservaçäo do leite humano ordenhado, para evitar a proliferaçäo do S. aureus e a conseqüente produçäo de enterotoxinas no produto, que por näo poderem ser removidas nem destruídas pelos procedimentos normais, levariam risco de vida a seus receptores

Detection of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) proviral DNA in breast milk and colostrum of seropositive mothers.

There is increasing evidence of vertical transmission of HIV-1 to infants through breast feeding of milk from HIV-1 infected mothers. It has been postulated that transmission occurs mainly via ingestion of infected cells in breast milk and colostrum. In this study, detection of HIV-1 proviral DNA was used to prove that cells from colostrum and milk do contain HIV. DNA were extracted from these cells of colostrum and milk of 18 seropositive mothers and amplified by nested PCR for HIV-1 gag and pol and 44 per cent were positive mostly by two primers. All ten negative control samples from seronegative mothers were negative. This study demonstrated the infectivity of breast milk and colostrum. Nevertheless, recommendation against breast-feeding should be weighed against poor alternatives in low socioeconomic families.